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钙调素

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1 拼音

gài tiáo sù

2 英文参考

Calmodulin

3 概述

钙调素(calmodulin,CaM)是一种重要的钙调节蛋白,几乎存在于一切真核细胞中,作为钙离子受体与细胞多种功能有关。多种疾病血液中CaM含量发生变化。采用放射免疫方法测定血浆caM浓度,对临床某些疾病的研究是一项有意义的指标。

4 钙调素的医学检查

4.1 检查名称

钙调素

4.2 分类

激素类测定 > 胰腺内分泌功能检查

4.3 钙调素的测定原理

RIA法:125I标记的CaM抗原与非标记的CaM抗原和限量的抗CaM特异性抗体竞争性结合,当125I标记CaM与抗CaM的量保持一定时,形成的放射性抗原抗体沉淀物的量反映待测样品中CaM含量。

4.4 试剂

(1)CaM纯品:自制同竞争ELISA法

(2)Na 125I溶液

(3)Bolton-Hunter试剂(BH):Sigma公司产品

(4)免抗CaM抗体制备:同ELISA法。

(5)125I-CaM的制备。先制备125I-BH试剂,再将该试剂通过酰胺键与CaM的末端氨基相联制得125I-CaM。将1μg重蒸苯溶解的BH试剂以氯胺T法加以碘化,经测试计算碘化率(Y)为53%。于125I-BH试剂中加入5μg的CaM(溶于0.125mol/L pH8.4的硼酸缓冲液中)于冰浴中充分搅拌30min,再加入100μl 0.2mol/L甘氨酸缓冲液终止反应,最后以Sephadex G-25柱(0.8cm×25cm)分离125I-CaM,经测算比放射性强度为1.56MBq/μg。

4.5 操作方法

(1)各管加入0.125mol/L pH 8.4硼酸盐缓冲液(含10g/L BSA)100μl。

(2)待测血清或系列标准液100μl。

(3)适量稀释抗体100μl。

(4)125I-CaM 100μl(约4×104cpm/min)。

混匀后于4℃反应24h,次日取出,以PEG法分离后吸弃上清。将上述分离后的沉淀物,于γ计数器上测定各管放射性强度并于半对数纸上绘制标准曲线,即可从标准曲线中算出样品CaM浓度。

4.6 正常值

血浆:(623±78.7)μg/L。

4.7 化验结果临床意义

钙调素增高见于:糖尿病高血压肿瘤

4.8 附注

目前RIA仍是国内测定各种激素水平的最常用方法。

4.9 相关疾病

糖尿病

相关文献

开放分类:化验及医学检查胰腺内分泌功能检查激素类测定
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参与讨论
  • 评论总管
    2019/10/15 7:33:24 | #0
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