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丁型肝炎抗原

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1 拼音

dīng xíng gān yán kàng yuán

2 英文参考

HDAg

hepatitis D antigen

3 概述

丁型肝炎病毒抗原存在于受感染细胞内和外周。丁型肝炎病毒急性感染早期,于乙型肝炎病毒表面抗原阳性期内可在血液中检出丁型肝炎病毒抗原,持续1~2周;慢性感染时可持续保持于低滴度水平。

4 丁型肝炎抗原的别名

δ肝炎抗原;HDAg

5 丁型肝炎抗原的医学检查

5.1 检查名称

丁型肝炎抗原

5.2 分类

血清学检查 > 病毒的血清学检查

5.3 化验取材

血液

5.4 丁型肝炎抗原的测定原理

丁型肝炎病毒抗原外被乙型肝炎表明抗原(HBsAg)包裹,当用除污剂(Tween20或NP40)裂解后才被释放出来,利用抗原抗体特异性结合的免疫学原理,应用双抗体夹心酶联免疫吸附法进行检测

5.5 试剂

(1)抗-HDV IgG纯化抗体用于包被

(2)HRP-抗HDV抗体。

(3)具有中和活性的抗HBc单克隆抗体ELISA滴度1∶10万,用于稀释HRP-抗HD

(4)10%Tween 20。

(5)其它器材和溶液均同上。

5.6 操作方法

(1)取包被液稀释抗-HDV IgG包被聚苯乙烯板,每孔100μl放37℃1h,4℃过夜。

(2)洗3次后,每孔分别加入待检血清和阴、阳性对照血清50μl(阴性对照血清孔,阳性对照血清2孔)和10%Tween20 50μl,充分混合均匀后放室温过夜,使之裂解丁肝病毒面包裹的HBsAg释放丁肝抗原。

(3)洗3次后,每孔加入50μl HRP-抗HDV抗体(稀释液中除含10%小牛血清外还含有10个ELISA单位的抗HBc单克隆抗体),放45℃1h(或37℃2h)。

(4)洗3次后,每孔加50μl新鲜配制的底物液,放室温暗处显色15~30min后每孔加25μl 2mol/L H2SO4终止反应

5.7 正常值

(1)目测法:棕色或黄色为HDAg阳性,无色为阴性。

(2)比色法:应用酶标仪测定波长492nm的光吸收值(A),根据样品的A值和阴性对照A平均值计算S/N值或阈值,凡样品S/N值≥2.1或大于阀值为阳性,反之为阴性。

阈值=阴性对照A492平均值×2.1。

5.8 化验结果临床意义

丁型肝炎病毒抗原,存在受感染的肝组织细胞内,外周血的完整病毒内,患者外周血中HDAG阳性表明体内有丁肝病毒复制,血中有丁型肝炎病毒。

5.9 附注

(1)由于丁型肝炎与乙型肝炎感染同时存在,外周血经除污剂处理后,可能HBAg与HBcAg同时存在,因此要注意注意防止HBcAg的干扰,故酶标记物中必须加入非标记的特异性中和HBcAg的单克隆抗体以排除之。

(2)由于外周血中抗原量少,血清不宜稀释至少要用30~50μl。

(3)测定结果最好用比色法,以免造成假阳性假阴性

(4)对可疑标本建议进行重复试验。

相关文献

开放分类:化验及医学检查血清学检查病毒的血清学检查
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  • 评论总管
    2019/9/18 0:38:32 | #0
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本页最后修订于 2013年2月25日 星期一 22:39:36 (GMT+08:00)
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