醋酸AS-D茶酚脂酶染色_血细胞化学染色、化验及医学检查

1 拼音

cù suān AS-Dchá fēn zhī méi rǎn sè

2 英文参考

Acetate AS-D catechol esterase staining

3 概述

氯乙酸萘酚酯酶是粒细胞及肥大细胞的标志酶，主要存在粒细胞的溶酶体内，此酶与过氧化酶在中性粒细胞中均呈阳性反应，但此酶形成的产物比过氧化酶更为特异。

4 醋酸AS-D茶酚脂酶染色的医学检查

4.1 检查名称

醋酸AS-D茶酚脂酶染色

4.2 分类

血细胞化学染色

4.3 醋酸AS-D茶酚脂酶染色的测定原理

氯乙酸AS-D萘酚被细胞内特异性酯酶（SE）水解，产生AS-D萘酚，后者与重氮盐（坚牢紫酱GBC）偶联，生成不溶性红色沉淀，定位于胞浆中。

4.4 试剂

（1）甲醛-甲醇固定液：10%甲醛与甲醇按1∶9混合。

（2）Veronal乙乙酸缓冲液：

甲液：乙酸钠（含3H2O） 1.94g

巴比妥钠 2.94g

蒸馏水加至100ml

乙液：0.1mol/L盐酸：取盐酸（比重1.19）0.85ml，加蒸馏水至100ml。

取甲液50ml，乙液45ml，再加蒸馏水135ml，用1mol/L盐酸调整pH至7.5～7.6。

（3）作用液：

氯乙酸AS-D萘酚 10mg

丙酮 0.5ml

蒸馏水 5ml（使溶解）

Veronal乙乙酸缓冲液 5ml

坚牢紫酱GBC 10mg

溶解，不必过滤立即染色，一次用完。

4.5 操作方法

（1）固定：新鲜干燥涂片，用甲醛-甲醇固定液固定30s，或用甲醛蒸气薰5～10min。

（2）水洗，凉干。

（3）放入作用液，37℃ 30min。

（4）水洗，苏木素染液复染1～2min。

（5）水洗，晾干，镜检。

4.6 正常值

粒细胞系统的原粒细胞为阴性反应，自早幼粒细胞至成熟中性粒细胞均为阳性反应，酶活性并不随细胞的成熟而增强。肥大细胞呈阳性反应。单核细胞、淋巴细胞、浆细胞、幼红细胞、血小板细胞均呈阴性反应。

4.7 化验结果临床意义

协助鉴别急性白血病类型：急性粒细胞白血病时，白血病性原始粒细胞可出现阳性反应；急性单核细胞白血病及急性淋巴细胞白血病时，白血病细胞呈阴性反应。

4.8 附注

（1）氯乙酸萘酚酯酶（NCE）最佳反应pH为7.0～7.6之间。它不被氟化钠抑制。

（2）严格遵守操作规程，如增加温度和pH值可导致氯乙酸苦酚分解，从而在细胞内产生明显的非特异性酯酶反应。