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长碳链脂肪酸

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1 拼音

cháng tàn liàn zhī fáng suān

2 英文参考

Long carbon chain fatty acids

3 概述

血中脂肪酸主要是以酯化形成存在。其中约45%与甘油、15%与CH、35%与PL合成酯、仅有5%脂肪酸呈游离状态,主要是长链脂肪酸

4 长碳链脂肪酸的医学检查

4.1 检查名称

长碳链脂肪酸

4.2 分类

血液生化检查 > 脂类测定

4.3 长碳链脂肪酸的测定原理

酶法测定血清游离脂肪酸分三步反应,反应式如下:

(1)

(2)

(3)

4.4 试剂

以Boehringer mannheim游离脂肪酸测定试剂盒为例:

(1)缓冲液Ⅰ:0.2mol/L pH7.5 KH2PO4(用5mol/L KOH调pH)。

(2)81mol/L ATP溶液:125mg ATP溶于2.5ml缓冲液Ⅰ中。

(3)10mmol/L MgCl2溶液。

(4)10mmol/L pH6.5辅酶A溶液。

(5)50g/L Triton X-100溶液。

(6)酰基辅酶A合成酶  8.4ku/L(用缓冲液Ⅰ配制)。

(7)2-(N-吗啉代)乙烷磺酸(2-morpholi-noethanesulphonic acid,MES)缓冲液:0.2mol/L,pH7.5(用KOH调pH)。

(8)N-乙基顺丁烯二酰亚胺(N-ethylmaleimide,NEM),20mmol/L(用MES缓冲液配制)。

(9)4-氨基安替比林溶液,15mmol/L(用MES缓冲液配制)。

(10)2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸(TBHB)溶液60mmol/L(用MES缓冲液配制)。

(11)过氧化物酶溶液,2000u/ml。

(12)1g/L NaN3溶液

(13)酰基辅酶A氧化酶溶液:约120u/ml(用缓冲液Ⅰ配制)。

4.5 操作方法

(1)混合试剂:

①试剂Ⅰ:含缓冲液Ⅰ 4.0ml、ATP 2.0ml、MgCl2 2.0ml、辅酶A 2.0ml、TritonX-100 4.0ml、酰基辅酶A合成酶2.0ml,加双蒸水4.5ml(共20.5ml)。

②试剂Ⅱ:含MES缓冲液10.0ml、4-氨基安替比林6.0ml、TBHB 8.0ml、NaN3溶液2.0ml、TritonX-100 4.0ml、过氧化物酶溶液0.4ml,双蒸水10.0ml(共40.4ml)。

③试剂Ⅲ:NEM缓冲液2.1ml、酰基辅酶A氧化酶2.0ml(共4.1ml)。

上述三种混合试剂4℃避光保存稳定3天。

(2)各管内加入试剂Ⅰ1ml与试剂Ⅱ2ml,混合,37℃10min。

(3)加入空白血清标本各50μl,混合后37℃5min,在546nm测定吸光度为A1

(4)加入试剂Ⅲ 0.20ml,混合,待20~25min反应停止后在546nm测定吸光度为A2

4.6 正常值

气相色谱质谱联用法:占总脂肪酸0.014%。

4.7 化验结果临床意义

升高:肾上腺白质营养不良症(ALD)。

4.8 附注

若血清游离脂肪酸浓度大于2mmol/L可适当稀释后再测。

相关文献

开放分类:血液生化检查脂类测定化验及医学检查
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参与讨论
  • 评论总管
    2020/10/28 20:23:10 | #0
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本页最后修订于 2013年2月26日 星期二 23:54:02 (GMT+08:00)
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