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anti-POV

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1 概述

脊髓灰质炎病毒(polioviurs)可引起脊髓灰质炎,又名小儿麻痹症。该病毒有3个血清型。脊髓灰质炎病毒的实验室诊断方法有病毒的分离鉴定分子生物学方法和血清学诊断方法。病毒的分离鉴定虽是常用方法,但一般的临床实验室难以进行。分子生物学方法主要是PCR核酸杂交。血清学诊断方法有中和试验、间接免疫荧光试验、反向间接血凝试验ELISA方法等。

2 anti-POV的别名

脊髓灰质炎病毒抗体

3 anti-POV医学检查

3.1 检查名称

anti-POV

3.2 分类

血清学检查 > 病毒的血清学检查

3.3 anti-POV的测定原理

病毒感染机体后,机体会产生针对该病毒的中和抗体。当含中和抗体的血清与病毒结合后,就使其失去感染细胞能力,接种细胞后,细胞就不会被感染产生病变。据此可以检测出体内是否含有针对该病毒的中和抗体及其效价

3.4 试剂

荧光显微镜;带孔载玻片;甘油;2/万伊文思蓝;Eagle液;小牛血清,0.01mol/L pH7.4 PBS;Vero或Hep-2细胞;脊灰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型参考株;异硫氰酸荧光素(FITC)标记的脊灰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型型特异的单克隆抗体

3.5 操作方法

(1)抗原片(靶细胞)制备,将脊髓灰质炎病人标本20%大便悬液,分别编号,各号分别感染Vero或Hep-2单层细胞各1瓶,待CPE出现++~+++时,用刮取或酶胰消化法,收集细胞悬液于10ml离心管中,1000r/min,离心5min,PBS洗3次,最后悬浮至0.3~0.4ml PBS中,使细胞浓度为1~2×106个细胞/ml,取带孔载玻片,滴片,使每孔内含细胞均为5×104~1×105,每份标本(包括参考毒株)各涂3孔。对照细胞3孔。

(2)涂好的抗原片,置空气中自然干燥,冷丙酮固定10min,可立刻使用或-20~70℃保存备用。

(3)用2/万伊文思蓝,按工作浓度分别稀释Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ型FITC-McAb。每份标本分别滴加Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型FITC-McAb各1孔,置湿盒中,37℃孵育30min后用PBS洗3次,50%PBS甘油封片,荧光显微镜读结果。

(4)判定标准:应考虑荧光细胞的数目分布亮度。荧光细胞多而闪亮++++;荧光细胞多而亮+++,荧光细胞亮度一般++;荧光细胞灰暗或朦胧+。

(5)凡那个型别荧光染色细胞出现++或以上者即判为该型病毒阳性,若有两个型或两个以上均出现荧光阳性染色细胞即为混合感染,对照成立。

3.6 正常值

阴性

3.7 化验结果临床意义

中和抗体为IgG型,出现较晚。脊髓灰质炎病毒感染后,在发病后2~3周达高峰,1~2年内逐渐下降,持续时间很长,一直保持一定水平。恢复期与急性期抗体效价有4倍或4倍以上增长,可诊断。

3.8 附注

中和试验特异性高,但操作繁琐费时,一般临床实验室做起来有困难。

3.9 相关疾病

脊髓灰质炎

相关文献

开放分类:化验及医学检查血清学检查病毒的血清学检查
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  • 评论总管
    2019/10/19 10:48:53 | #0
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本页最后修订于 2013年2月24日 星期日 23:20:14 (GMT+08:00)
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