1 拼音
WS/T 36—1996 niào zhōng gè de fēn guāng guāng dù cè dìng fāng fǎ
2 英文参考
Urine—Determination of chromium—Spectrophotometric method
中华人民共和国卫生行业标准 WS/T 36—1996《尿中铬的分光光度测定方法》（Urine—Determination of chromium—Spectrophotometric method）由中华人民共和国卫生部于1996年10月14日发布，自1997年05月01日起实施。
3 1 主题内容与适用范围
本标准规定了尿中铬的分光光度测定方法。
本法最低检测浓度为0.008 mg/L。
本标准适用于接触铬及铬盐工人尿中铬浓度的测定。
4 2 原理
尿样经酸消化后，在酸性条件下，用高锰酸钾将三价铬氧化为六价铬，六价铬与二苯碳酰二肼生成紫红色铬合物，在波长540 nm处比色定量。
5 3 仪器
3.1 分光光度计，30 mm比色杯。
3.2 具塞磨口比色管，50 mL。
3.3 锥形瓶，200 mL。
3.4 电热板。
3.5 聚乙烯塑料瓶。
3.6 尿比重计。
6 4 试剂
本标准所用试剂除另有说明者外，均为分析纯试剂。
4.1 实验用水：蒸馏水或同等纯度的去离子水。
4.2 硫酸．ρ20=1.84 g/mL。
4.3 高氯酸，ρ20=1.67 g/mL。
4.4 磷酸，ρ20=1.68 g/mL。
4.5 氨水，ρ20=0.90 g/mL。
4.6 1+3硫酸溶液。
4.7 高锰酸钾溶液，30 g/L。
4.8 叠氮化钠溶液，5 g/L。
4.9 甲基橙溶液，1 g/L。
4.10 二苯碳酰二肼溶液，0.4 g/L:称取0.1 g二苯碳酰二肼溶于50 mL95%（v/v）乙醇中，再加入200 mL 1+9硫酸，摇匀。贮存于棕色瓶中，于冰箱保存，可使用一个月。
4.11 铬标准溶液：称取120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾（K2Cr2O7）0.1415 g，用水溶解，移入容量瓶中稀释到500 mL。此溶液1 mL=0.1 mg铬。使用时逐级稀释成1 mL=10.0 μg铬标准应用液。
4.12 质控样：用标准尿样、加标的模拟尿、加标的正常人混合尿或接触者混合尿作质控样。
7 5 采样、运输和保存
用聚乙烯广口瓶收集接触者尿样150 mL以上，常温下带回实验室（夏季运输时，最好冷藏），测比重后于4℃可保存一周。
8 6 分析步骤
8.1 6.1 样品处理
6.1.1 取50 mL比重为1.010～1.030尿样，置于锥形瓶中，同时取50 mL水（4.1）做试剂空白，加5 mL硫酸（4.2），于电热板上消化至刚炭化时取下，冷却，加2 mL高氯酸（4.3）。
6.1.2 继续消化至液体剩下1 mL左右。取下冷却后加30 mL水（4.1）及1滴甲基橙（4.9），用氨水（4.5）调至黄色，再用1+3硫酸调到刚变红色。加0.15 mL磷酸（4.4），1滴高锰酸钾溶液（4.7），于电炉上煮沸约10 min。溶液应保持淡紫色，如溶液呈棕色可补加高锰酸钾溶液（4.7），趁沸滴加叠氮化钠溶液（4.8）使溶液无色透明，再煮沸2 min。冷却后移入50 mL比色管中，加水（4.1）至刻度。
8.2 6.2 标准曲线的绘制
6.2.1 取6只200 mL锥形瓶按下表配制标准管。
铬标准管的配制
管 号 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
标准应用液（4.11），mL | 0 | 0.1 | 0.3 | 0.5 | 0.7 | 1.0 |
水，mL | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 |
硫酸（4.2），mL | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 |
铬的含量，μg | 0 | 1 | 3 | 5 | 7 | 10 |
6.2.2 各锥形瓶放在电热板上消化至液体剩下约10 mL，取下，冷却，加2 mL高氯酸（4.3）。然后按6.1.2 条继续操作。
6.2.3 加1 mL二苯碳酰二肼溶液（4.10），混匀。20 min后在540 nm处，用30 mm比色杯，以零管作参比，测量吸光度。
6.2.4 以铬含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
8.3 6.3 样品测定
取6.1.2条制备的稀释至50 mL的样品溶液，按6.2.3条操作，测量吸光度，在标准曲线上查出样品溶液中铬含量。在测定前后以及每测定10个样品后，测定一次质控样。
9 7 计算
7.1 按式（1）计算尿样换算成标准比重（1.020）下的浓度校正系数k。
7.2 按式（2）计算尿中铬的浓度。
式中：X——尿中铬的浓度，mg/L；
m——由标准曲线上查出的铬含量，μg；
V——分析时所取尿样体积，mL。
10 8 说明
8.1 本法的检测限，取50 mL尿样时为0.008 mg/L；测定范围：0.008～0.200 mg/L；精密度：CV=4.6%～8.2%（尿铬浓度0.022～0.140 mg/L，n=6）。准确度：尿样加标回收率=92.0%～95.6%。
8.2 接触者尿样采集时间不限。采尿样时要脱离现场环境，换下工作服，洗手，以防铬尘污染。
8.3 铬与二苯碳酰二肼显色时，硫酸浓度应控制在0.05～0.30 mol/L。酸度低，显色慢，高于0.30 mol/L也会使显色减弱。本方法在最后的50 mL测定溶液中酸度为0.20 mol/L。在上述操作条件下15 min显色完全，颜色在90 min内保持稳定。
11 附加说明：
本标准由卫生部卫生监督司提出。
本标准由山东省劳动卫生职业防治研究所负责起草。本标准主要起草人赵兰英。
本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所负责解释。