1 概述
两步沉淀法可以测定HDL2及HDL3。第一步是测定HDL-C;第二步是使含脂质较多的HDL2沉淀,测定上清中的HDL3-C即可根据总HDL-C计算得HDL2-C。两步沉淀最好使用两种浓度的同一种试剂作沉淀剂。
2 别名
HDL2-C
3 高密度脂蛋白2-胆固醇的医学检查
3.1 检查名称
高密度脂蛋白2-胆固醇
3.2 分类
血液生化检查 > 脂类测定
3.3 高密度脂蛋白2-胆固醇的测定原理
以DS50(Mr50000±5000)与Mg2+沉淀血清中含apoB的脂蛋白[LDL、VLDL、LP(a)],测定上清液中的胆固醇,代表总HDL-C。
HDL是颗粒大小及组成很不均一的脂蛋白,主要包括HDL2、HDL3亚组分(HDL1很少),适量增加DS50和Mg2+浓度,可使血清中的HDL2随含apoB的脂蛋白同时沉淀,离心后上清液中只含HDL3,故可测出HDL3-C。总HDL-C与HDL3-C之差即为HDL2-C。
3.4 试剂
(1)聚乙二醇,分子量20000。
(2)0.1mol/L磷酸盐缓冲液,pH6.5。
(3)0.1mol/L磷酸盐缓冲液,pH7.5。
(4)沉淀剂Ⅰ:95g聚乙二醇20000溶于0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH 6.5)中并加至1L。
(5)沉淀剂Ⅱ:150g聚乙二醇20000溶于0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.5)中并加至1L。
(6)标准液:同HDL-C测定用标准参考血清,不包括沉淀步骤。
3.5 操作方法
(1)100μl血清与200μl沉淀剂Ⅰ混合,室温放置10min后离心,吸上清液100μl与酶试剂1.0ml混合测定胆固醇,即HDL-C。
(2)100μl血清与200μl沉淀剂Ⅱ混合,室温放置10min后离心,吸上清液100μl与酶试剂1.0μl混合测胆固醇,即HDL3-C。
HDL2-C=HDL-C-HDL3-C
3.6 正常值
HDL2-C约占总HDL-C的1/3HDL3-C约占2/3,女性HDL2-C稍高于男性。由于方法不一致,各家报告的数据有较大差异。
3.7 化验结果临床意义
在生理与病理状态下HDL-C水平的变动大都由于HDL2-C的变化,而HDL3-C水平的变化较小。冠心病人HDL2-C下降要比总HDL-C下降更明显,因此HDL2可能成为更好的冠心病危险因素的判别指标。
3.8 附注
由于HDL亚类含量较低,测上清液胆固醇时取样量较大。结果应计算血清稀释倍数。