CoHb

目录

1 概述

一氧化化碳(carbon monoxide,CO)为无色气体,有微弱的臭味。分子式CO,分子量28.01。熔点-199℃。沸点-191℃。微溶于水,易溶于氨水。在空气中燃烧时火焰呈蓝色。CO与氧的混合物燃烧时易发生爆炸。CO是一种常见的严重危害人体健康的窒息性化学毒物。它是各种燃料不完全燃烧的产物。民用小煤炉、工业废气和汽车废气都是重要的CO污染源。CO污染对人体健康的危害,主要表现在它与血液中的血红蛋白(Hb)结合,形成碳氧血红蛋血红蛋白(carboxy-hemoglobin,COHb)后,使Hb失去输氧能力。严重CO中毒时,可因组织缺氧而导致死亡。因此,血中COHb浓度的监测在健康监护方面具有重要意义。

2 别名

一氧化碳血红蛋白;CoHb

3 血液碳氧血红蛋白的医学检查

3.1 检查名称

血液碳氧血红蛋白

3.2 分类

血液生化检查 > 蛋白质测定

3.3 血液碳氧血红蛋白的测定原理

(1)碳氧血红蛋血红蛋白定性试验:一氧化化碳与血红蛋白结合后,形成樱桃红色的碳氧血红蛋血红蛋白,它对碱抵抗力较正常血红蛋白为强。

(2)碳氧血红蛋血红蛋白双波长定量测定:用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)将血中的HbO2、MetHb还原成Hb,使血中多组分的血红蛋白转化为只有Hb和COHb两个组分,前者的最大吸收波长为320nm,后者为432nm,在分光光度计上分别测出被检血样在420nm和432nm两个波长处的吸光度,代人依比尔定律建立的联立方程式,求出血样COHb含量。

3.4 试剂

(1)碳氧血红蛋血红蛋白定性试验:50g/L NaOH。

(2)碳氧血红蛋血红蛋白双波长定量测定:

①0.1mol/L PBS,pH6.85取13.6g KH2PO4溶于约800ml去离子水中,溶解后加去离子水至1.0L(A液)。取17.4g K2HPO4溶于约800ml去离子水中,溶解后加去离子水至1.0L(B液)。然后将A液和B液按1∶1的比例配制成pH6.85缓冲液,用0.1mol/L的NaOH或0.1mol/L的HCl调整pH至6.85。此为试剂Ⅰ。

②溶血剂:取试剂Ⅰ1份,加9份去离子水稀释。此为试剂Ⅱ。

③Na2S2O4(AR级):直接使用干粉,现用现称。因其易吸湿分解失效,应避免干燥保存。

3.5 操作方法

(1)碳氧血红蛋血红蛋白定性试验:

①取试管2支,各加蒸馏水3~5ml,一管加患者血液3滴,另一管加正常人对照血3滴,混匀。此时。如患者血中有一氧化化碳,则血液呈樱桃红色。

②每管各加50g/L NaOH 1滴,轻轻混合,正常对照管呈绿褐色,如患者血液中有碳氧血红蛋血红蛋白,则溶血液仍呈樱桃红色,为阳性;如与正常对照色泽一致为阴性。

(2)碳氧血红蛋血红蛋白双波长定量测定:

①F值制定:制备Hb溶液(不含COHb)和饱和COHb溶液(COHb含量为100%)。取不吸烟并于近期无CO接触史者的全血50μl,加入6.0ml试剂Ⅱ中,放置5min,使充分溶血。另取两只25.0ml容量瓶,每瓶准确加入上述溶血液2.0ml,在通风橱内,其中一瓶通入空气5min;另一瓶通入煤气(CO)1min,然后通入氮气2min。每瓶加入Na2S2O4250mg,加试剂Ⅰ至刻度,加塞颠倒3~5次,使其溶解。10min后,用420nm和432nm两波长比色,以试剂Ⅱ调零,记录AHb420、AHb432、ACOHb420、ACOHb432。根据比尔定律:A=a·b·c,因为Hb和COHb均来自同一份样,血红蛋白含铁摩尔浓度(c)相同,比色条件相同(b),故:

应用上法,测得F值分别为F1=1.3041;F2=0.5742;F3=1.8627。

②样品测定:取小试管一支,加试剂Ⅱ1.2ml,加入常规采取的指血10μl,混匀5min使之溶血,另取带塞试管一支,取上述溶血液0.2ml与2.3ml试剂Ⅰ相混合,加Na2S2O425mg,加塞颠倒使其溶解,10min后用试剂Ⅱ调零,在窄带宽型分光光度计上用420nm和432nm两个波长比色,记录A420和A432

3.6 正常值

定性:阴性

定量:不吸烟者:0~0.023       (0~2.3%)

吸烟者:  0.021~0.042   (2.4%~4.2%,<6.5%)

3.7 化验结果临床意义

升高:一氧化化碳中化碳中毒(CoHb>50%致死)。

3.8 附注

(1)碳氧血红蛋血红蛋白定性试验:

①观察结果须及时,否则樱桃红色逐渐褪去,不易分辨。

②本试验敏感性较差,血液中一氧化化碳含量到一定程度时才显阳性。如患者事先已采取通气措施,血中一氧化化碳含量下降,试验可阴性。但临床症状、体征仍可能存在。

(2)碳氧血红蛋血红蛋白双波长定量测定:

①COHb定量测定中,没有标准品,确定公式中F1,F2,F3的值是COHb准确定量的前提,虽然有文献提供F值,但由于各实验室的设备条件不完全一致,如分光光度计的单色光波长宽度、波长误差等,因此不宜直接套用文献F值,应依据所使用的分光光度计确定F值。F值确定后,只要仪器条件不改变,可以一直使用,故不会增加常规样品测定的工作量。

②在制备100%饱和度COHb(用于制定F值)时,如无民用煤气,也可用化学方法制备CO:取甲酸100ml和硫酸150ml混合,产生的气体依次通入NaOH(5mol/L)、水和CaCl2(0.5mol/L)中进行纯化后收入乳胶手套内备用。

③本法的方法学评价结果:样品显色后,30min内呈色稳定;重复试验结果(n=20):=10.41%,s=0.21,CV3.7%;回收率为92.7%~106.3%。

3.9 相关疾病

一氧化碳中毒

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