C3致肾炎因子

目录

1 拼音

C3zhì shèn yán yīn zǐ

2 英文参考

C3 nephritic factor

3 概述

C3肾炎因子(C3Nef)是旁路途径C3转化酶(C3b,Bb)的一种IgG类自身抗体,C3Nef与C3b、Bb按1∶1∶1比例结合,可以使此酶稳定,免遭C3b-INA和B1H的灭活,从而导致C3和其他补体成分经旁路途径活化。检测C3Nef时,一般将正常人血清与待测血清在EGTA存在下共育,如正常人血清中天然C3消耗或转化为C3裂解产物(C3SP),即说明待测血清中有C3Nef存在。

4 别名

C3肾炎因子

5 C3致肾炎因子的医学检查

5.1 检查名称

C3 致肾炎因子

5.2 分类

免疫学检查 > 细胞免疫测定

5.3 C3致肾炎因子的测定原理

(1)交叉免疫电泳测定法:将待测血浆加至正常人血浆中,如前者含C3Nef,可使后者中的C3发生裂解。电泳使C3SP与天然C3分开后作交叉电泳可见2个沉淀峰。与对照(应只一个沉淀峰)比较即可判定有无C3Nef。

(2)溶血法:含C3Nef的血清、正常人血清和绵羊红细胞(SRBC)在含EGTA的缓冲液中共育时,在SRBC上可形成与细胞结合的稳定的C3b、Bb·C3Nef,后者可使随后加入的大鼠血清中的补体成分活化,导致SRBC溶解。溶血程度与C3Nef量呈正相关。

5.4 试剂

(1)交叉免疫电泳测定法:

①0.05mol/L EGTA+0.1mol/L MgCl2:EG-TA(乙二醇双乙胺醚-N,N-四乙酸)1.9g,MgCl2·6H2O 2.03g,加蒸馏水80ml,60℃加热并加4mol/L NaOH使溶,校pH为7.45,补加蒸馏水至100ml。

②0.2mol/L EDTA:EDTA-Na2·2H2O 7.4g,配法同EGTA。

③7.5mmol/L EDTA:EDTA-Na2·2H2O 2.79g溶于蒸馏水1000ml中。

④待测和对照血浆:迅速分离血浆后立即测定或-70℃冻存。

(2)溶血法:

①EGTA-VBS:巴比妥0.26g,巴比妥纳0.17g,NaCl 3.50g、MgCl2·6H2O 0.40g,EG-TA3.04g加蒸馏水至500ml,调pH至7.4。

②EDTA-VBS:巴比妥2.88g、巴比妥纳1.88g、EDTA-Na23.79g,明胶1.00g,NaCl 0.85加蒸馏水至1000ml,调pH至7.4。

③2.5%SRBC悬液:SRBC用生理盐水洗2次,EGTA-VBS洗1次。用前以EGTA-VBS配成2.5%悬液。

④待测血清与正常对照血清:采血后尽快分离,立即检测或-30℃保存,1周内检测。

⑤大鼠血清:2~3只健康大鼠血清混合,分装,-30℃保存。

5.5 操作方法

(1)交叉免疫电泳测定法:按表加样(表1)。

①将各管置37℃水浴45min,自管3与管4各取出25μl加至管2,混匀。

②浇注含0.35g/L EDTA-Na2的10.0g/L琼脂糖凝胶3ml于7cm×7cm玻璃板之一边(宽2cm,可用框架浇注),凝固后于距阴极侧1cm、4cm处各打孔一个,分别注入管1、2内容物各10μl。10V/cm电泳1h。取下凝胶板,在空余的5cm板面上浇注含抗C3血清的10.0g/L琼脂糖凝胶8ml,使与原先的胶面融合。凝固后与第一次电泳方向垂直,作第二次电泳,3V/cm电泳6~8h。观察沉淀峰。

(2)溶血法:

①取2.5%SRBC悬液120μl,加待测血清和正常对照血清各40μl,30℃水浴10min后用EDTA-VBS洗5次。

②沉积细胞加入用EDTA-VBS作1∶10稀释的大鼠血清0.2ml,37℃水浴60min。

③补加EDTA-VBS 1ml后2000r/min离心10min,取上清于412nm测吸光度。

5.6 正常值

以>0.128为C3Nef阳性。

5.7 化验结果临床意义

膜增殖性肾小球肾炎、部分脂肪营养不良(PL)、急性肾小球肾炎、SLE、脑膜炎等可呈阳性。

5.8 附注

管1、管2均为单峰时判为阴性。管1为双峰,管2为单峰为C3Nef阳性。如管2也为双峰,则可能是试验过程中C3自然裂解造成的假阳性,也可能是待测血清中已存在有C3裂解产物之故。

5.9 相关疾病

脂肪营养不良、急性肾小球肾炎

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